-15° giorno-
Western blotting: Immunodecorazione

Procedimento:
Colorazione per metodi immunochimici della proteina ricombinante.

Note, risultati e conclusioni:
Per la colorazione, utilizziamo un coniugato ANTICORPO-ENZIMA: l'anticoropo monoclonale sensibile alla coda di polistidine, l'enzima è una fosfatasi alcalina.

Mettendo a contatto l'immunoconiugato e la membrana di nitrocellulosa,, gli anticorpi si legheranno specificatamente alla coda di polistidine. L'aggiunta di una soluzione contenente BCIP e NBT, permette la colorazione di queste zone, nelle quali è presente l'immunoconiugato.
Il BCIP infatti viene defosforilato dall'enzima coniugato con l'anticorpo, trasformandolo in INDOLO, il quale reagendo con l'NBT (che funge da ossidante), forma due composti colorati e insolubili; ciò causa una precisa ed evidente indicazione della banda in cui è presente la TgFNR.