-1° Giorno-
Determinazione della concentrazione di DNA in soluzione attraverso
metodi spettrofotometrici
Procedimento:
Fornito un campione a concentrazione ignota di DNA (pGEM 7zf), attraverso
metodi spettrofotometrici è stata valutata la presenza di
contaminanti proteici e calcolata la concentrazione dell'acido nucleico.
Note, risultati e conclusioni:
L'entità dell'assorbimento varia in funzione della natura
del DNA, infatti DNA denaturato assorbe di più.
In particolare l'assorbanza (A) è in proporzione alla concentrazione,
come descritto dalla legge di Lambert-Beer (che è valida
solo per luce monocromatica).
A260nm |
A280nm |
0.092 |
0.057 |
Con coefficiente di purezza = A260/A280 = 1.614
Dove se questo valore è maggiore o uguale a 1.7 si a una
preparazione pura di DNA, altrimenti è presente una contaminazione
proteica.
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