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Isolamento stigmasterolo dall'olio di soia

Scopo:
Scopo dell'esperimento è estrarre lo stigmasterolo e analizzarlo mediante TLC avendo come riferimento quello reperibile commercialmente.

Materiale occorrente:
Vetreria:Pallone da 500ml, Claisen, beuta da 250 ml, imbuto separatore da 250 ml, 2 beute da 50 ml, ricadere, agitatore grande
Sostanze: olio di soia, etanolo, KOH, etere di petrolio, stigmasterolo
Altro: lastrine da TLC

Procedimento:
- Mettere in un pallone da 500ml 40g di olio di soia del commercio e 200ml di EtOH.
- Aggiungere 40g di KOH sciolti nella minima quantità di acqua, ed alcuni ebollitori. Mandare in riflusso per circa due ore.
- Lasciar raffreddare, versare in un beuta da 1l contenente 200ml d'acqua .
- Aggiungere 100ml di etere di petrolio e agitare vigorosamente per 30 minuti.
- Travasare in un imbuto separatore da 1l, separare le fasi ed evaporare la parte organica (anidrificare se necessario). Calcolare la resa.
- Analizzare l'estratto con TLC usando come eluente etere di petrolio - acetato di etile in un rapporto 7:1.
- Visualizzare il risultato della TLC con un reagente ossidante (a base di ammonio molibdato e cerio solfato).

Calcoli e dati:
Peso olio usato: 40.25g
Tara: 81.64g
Peso lordo: 83.81g

Estratto: Peso lordo - Tara = 83.81g-81.64g = ?

Resa: resa Stigmasterolo

Osservazioni:

Stigmasterolo
Stigmasterolo

Nell'olio di soia lo stigmasterolo è in parte libero ed in parte esterificato in cere. Effettuiamo così una saponificazione per ottenere una sua estrazione.
Il passaggio in cui si agita in beuta serve per evitare l'uso dell'imbuto separatore che porterebbe alla formazione di schiume, a causa degli acidi grassi saponificati, che renderebbero molto fastidioso il lavoro.
La visualizzazione, come preannunciato nel procedimento, non avviene con una TLC e sua visualizzazione con UV, ma si sfrutta un reagente. In questo caso è stato usato un reagente ossidante, che permette attraverso una reazione cromogena, la localizzazione della sostanza.

Risultati e conclusioni:
La resa ottenuta è stata del 2.2%. Osservando però la TLC si notava la presenza di numerose altre sostanze, identificate come bande sul percorso effettuato dal campione estratto nella TLC.

 

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