Globe

		GLOBE

		Il progetto GLOBE e i protocolli di analisi

I protocolli del progetto GLOBE

alcalinità
L' esame dell'alcalinità viene effettuato per constatare la durezza dell'acqua ovvero la presenza di ioni di calcio

PROTOCOLLO MISURA DELL’ALCALINITA'

SCOPO : Determinare l'alcalinità del campione d'acqua

GENERALITA’ : L'alcalinità è in stretta relazione con i tipi di specie acquatiche che possono sopravvivere nell’acqua.

TEMPO DI ESECUZIONE : 15 minuti

MATERIALI ED ATTREZZATURE :

Kit per il test alcalinità

Bicarbonato di sodio

acqua distillata

salviette di carta



MISURAZIONE :

(valore p positivo viraggio dell’indicatore a pH 8,2

Lavare il recipiente dell’analisi con l’acqua del campione e riempirlo fino alla tacca dei 5 ml

Aggiungere 2 gocce dell’indicatore P (reattivo 1) ed agitare (la soluzione dovrebbe assumere un colore tra il rosa e il rosso altrimenti passare al metodo m).

Riempire la pipetta con il titolante (reattivo 3) ed aggiungerlo goccia a goccia, agitando, al campione finché diventa incolore.

Leggere l’alcalinità in mmol/l sulla scala graduata della pipetta da titolazione.

(valore m positivo viraggio dell’indicatore a pH 4,3

Lavare il recipiente dell’analisi con l’acqua del campione e riempirlo fino alla tacca dei 5 ml.

Aggiungere 2 gocce dell’indicatore M (reattivo 2) ed agitare (se la soluzione assume un colore rosso-arancio, l’acqua non è alcalina e va determinata l’acidità).

Riempire la pipetta con il titolante (reattivo 3) ed aggiungerlo goccia a goccia, agitando, al campione finché il colore vira dal bleu al rosso-arancio passando per il grigio.

Leggere l’alcalinità in mmol/l sulla scala graduata della pipetta da titolazione.

torbidità
La torbidità serve a determinare la quantità di particelle in sospensione nell'acqua ossia la materia inanimata presente; in poche parole si cerca di stabilire la limpidità dell'acqua. Più l'acqua è torbida più i raggi solari fanno fatica a penetrare e quindi è più difficile per la flora assimilarli e portare a compimento la fotosintesi clorofilliana.

PROTOCOLLO RILEVAMENTO TORBIDITA’

SCOPO : Determinare la torbidità dell’acqua.

GENERALITA’ : La torbidità dipende dalla quantità di sostanze sospese o colorate presenti nell’acqua. Esse provengono sia dai sedimenti dilavati dal corpo d’acqua, sia dall’attività biologica all’interno del corpo d’acqua.

TEMPO DI ESECUZIONE : 10-15 minuti

MATERIALI ED ATTREZZATURE :

Tubo di torbidità dotato di tappo

Pennarello

Metro

MISURAZIONE :

Versare l’acqua del campione nel tubo finché l’immagine sul fondo del tubo non sia più visibile quando si guarda direttamente l’immagine attraverso la colonna d’acqua.

Far ruotare il tubo mentre si guarda l’immagine per assicurarsi che non si possano distinguere i settori bianchi e neri.

Misurare l’altezza della colonna e registrare tale dato nel Foglio Raccolta Dati

pH

Il pH serve a determinare il grado di acidità o basicità dell'acqua. L'oscillazione del ph dipende dalla presenza di sostanze inquinanti.Il grado di basicità o acidità non risulta sempre costante:le specie viventi vivono in un determinato livello di intervallo; se questo livello venisse sconvolto da sostanze chimiche inquinanti la sopravvivenza della flora e della fauna verrebbe seriamente compromessa.

PROTOCOLLO MISURA DEL pH

SCOPO : Determinare il pH del campione d’acqua.

GENERALITA’ : Il pH è un fattore fondamentale per la vita dell’ecosistema acquatico.

TEMPO DI ESECUZIONE : 5 minuti

MATERIALI ED ATTREZZATURE :

pH-metro

soluzioni standard

acqua distillata

salviette di carta

MISURAZIONE :

Sciacquare l’elettrodo del pH-metro con acqua distillata ed asciugarlo con una salvietta morbida ;

immergere, agitando leggermente, l’elettrodo del pH-metro nella prima soluzione standard (pH 7) per verificarne la taratura;

sciacquarlo con acqua distillata e asciugarlo tamponandolo con la salvietta di carta;

immergere, agitando leggermente, l’elettrodo del pH-metro nella seconda soluzione standard (pH 4);

sciacquarlo con acqua distillata e asciugarlo tamponandolo con la salvietta di carta;

immergere, agitando leggermente, l’elettrodo del pH-metro nella seconda soluzione standard (pH 10);

sciacquarlo con acqua distillata e asciugarlo tamponandolo con la salvietta di carta;

<![endif]> immergere l’elettrodo del pH-metro nel campione d’acqua da testare e lasciare che si stabilizzi;

registrare il valore sul foglio Raccolta Dati;

ripetere la misura su un’altra aliquota di campione (i dati dovrebbero essere in accordo entro le 0,2 unità di pH);

sciacquare l’elettrodo ed asciugarlo.

Temperatura

La temperatura è stata misurata per determinarne le oscillazioni; infatti le specie viventi hanno meno problemi relativi alla sopravvivenza o alla riproduzione se vivono in un ambiente senza grandi variazioni termiche.

PROTOCOLLO RILEVAMENTO TEMPERATURA

SCOPO : Determinare la temperatura del campione d’acqua.

GENERALITA’ : La temperatura del campione d’acqua influenza il pH, la quantità di ossigeno disciolto, la salinità, nonché la vita dell’ecosistema acquatico.

TEMPO DI ESECUZIONE : 5 minuti

MATERIALI ED ATTREZZATURE :

Termometro;

Orologio;

Spago;

MISURAZIONE :

Legare accuratamente al termometro un capo dello spago e l’altro al polso dell’allievo che effettua la misurazione;

immergere il termometro ad una profondità di 10 cm nell’acqua per circa 3-5 minuti;

sollevare il termometro dall’acqua quanto basta per rilevare il valore misurato;

ripetere almeno altre due volte l’operazione;

registrare il valore sul foglio Raccolta Dati;

Prendere il risultato medio registrato dagli studenti (il range deve essere di 1°C), in caso contrario ripetere la misura.

Conducibilità

La conducibilità elettrica serve a determinare la presenza di sali nell'acqua.La misurazione si basa sul principio secondo il quale quanto più è elevata la concentrazione di sali, tanto più risulterà alto il livello di conducibilità dell'acqua.Per esempio, l'acqua distillata, che è priva di sali, non conduce elettricità.

PROTOCOLLO MISURA DELLA CONDUCIBILITA'

(solo per acque dolci)

SCOPO :Determinare la conducibilità del campione d’acqua.

GENERALITA’ : La conducibilità è una misura della quantità di sali disciolti in acqua ed è un fattore che influenza la vita dell’ecosistema acquatico.

TEMPO DI ESECUZIONE : 5 minuti

MATERIALI ED ATTREZZATURE:

Conduttimetro;

soluzioni standard;

acqua distillata;

salviette di carta

MISURAZIONE :

Sciacquare la sonda del conduttimetro con acqua distillata e tamponarla con una salvietta morbida;

immergere, agitando leggermente, la sonda del conduttimetro nella soluzione standard per verificarne la taratura;

sciacquare con acqua distillata e asciugare tamponando con la salvietta di carta;

immergere, agitando leggermente, la sonda del conduttimetro nel campione d’acqua da testare e lasciare che si stabilizzi;

leggere e registrare il valore sul foglio Raccolta Dati;

ripetere la misura su un’altra aliquota di campione, in accordo entro il range di 40mS/cm;

sciacquare la sonda ed asciugarla.

Ossigeno

L'ossigeno disciolto nell'acqua viene misurato per controllarne la quantità. Infatti se nell'acqua c'è troppo poco ossigeno la sopravvivenza di flora e fauna è messa in pericolo. La scarsa presenza di ossigeno dipende dalla presenza di sostanze nutrienti per le alghe e quindi inquinanti(nitrati) perchè le alghe consumano l'ossigeno necessario agli altri esseri viventi per vivere dando luogo al fenomeno dell'eutrofizzazione.

PROTOCOLLO MISURA OSSIGENO DISCIOLTO

SCOPO : Determinare la quantità di ossigeno disciolto contenuto nel campione d’acqua.

GENERALITA’ : L'ossigeno disciolto è strettamente legato alla sopravvivenza della vita animale e vegetale in tutti i corpi d’acqua. E’ condizionato da processi naturali e da attività umane.

TEMPO DI ESECUZIONE : 20 minuti

MATERIALI ED ATTREZZATURE :

Kit per l’analisi dell’ossigeno disciolto;

Acqua distillata;

forbici

MISURAZIONE : (concentrazione 1-20 mg/L)

Riempire il flacone per testare l’ossigeno disciolto lasciando debordare l’acqua per 2-3 minuti;

evitare che si formino bolle mentre riempite il flacone;

<![endif]> inclinare il flacone e chiuderlo, con un movimento secco e rapido, con il tappo di vetro. (Se si formano bolle d’aria, eliminare il campione e ricominciare da capo);

rimuovere il tappo ed aggiungere il contenuto delle bustine dei reagenti Ossigeno 1 e Ossigeno 2;

chiudere dolcemente per evitare la formazione di bolle d’aria. (Se si formano bolle d’aria, eliminare il campione e ricominciare da capo);

agitare vigorosamente per mescolare. Si formeranno dei fiocchi di precipitato. Un precipitato marrone - arancio è indice di ossigeno disciolto presente;

Attendere la decantazione dei fiocchi fino a metà del volume del flacone. I fiocchi non decantano se vi è forte presenza di cloruri. In questo caso attendere 4-5 minuti prima di procedere e agitare ancora vigorosamente il flacone;

togliere il tappo al flacone ed aggiungere il contenuto della bustina di reagente Ossigeno 3;

chiudere dolcemente per evitare la formazione di bolle d’aria. (Se si formano bolle d’aria, eliminare il campione e ricominciare da capo)<![endif]> ;

agitare vigorosamente il flacone. I fiocchi si dissolveranno e il campione diventerà giallo se l’ossigeno è presente;

riempire con il campione il piccolo tubo di plastica e svuotarlo poi nella bottiglia squadrata;

aggiungere la soluzione standard di sodio tiosolfato goccia a goccia, mescolando per effettuare la titolazione, finché il campione diventa incolore;<![endif]>

il numero totale di gocce di titolante usate equivale ai mg/L di Ossigeno Disciolto. Se il risultato dovesse essere 3mg/L è preferibile effettuare un test più sensibile

*    Nella metodica con concentrazioni 0.2-4 mg/L il procedimento è il medesimo solo che il campione che viene titolato è di 30 ml ed il numero di gocce usate deve essere moltiplicato per 0,2 per dare i mg/L di Ossigeno Disciolto.

Nitrati

Una grande presenza di nitrati è indice di inquinamento. I nitrati costituiscono il nutrimento essenziale delle alghe, quindi un' eccessiva concentrazione di alghe sta ad indicare una grande presenza di nitrati.Questo causerebbe un pericoloso squilibrio nell'ecosistema.

PROTOCOLLO MISURA DEI NITRATI

SCOPO : Determinare la quantità di azoto nitrico (ione nitrato) contenuto nel campione d’acqua.

GENERALITA’ : I nitrati costituiscono un nutriente essenziale per alghe ed altre piante acquatiche e sono i principali responsabili, assieme al fosforo, dei processi di eutrofizzazione.

TEMPO DI ESECUZIONE : 15 minuti



MATERIALI ED ATTREZZATURE :

Kit per l’analisi dei nitrati;

acqua distillata;

forbici

MISURAZIONE : (concentrazione 0-10 mg/L) se si pensa ad un forte inquinamento

Sciacquare, più volte, con l’acqua da campionare le provette per il test;

riempire il contagocce fino a 0,5 ml con l’acqua da campionare e metterla in una delle due provette;

portare al volume di 5 ml con acqua distillata (si è effettuata una diluizione);

aggiungere, dopo averlo aperto con le forbici, il contenuto della bustina di Nitraver 6 nella provetta, agitando per 3 minuti;

lasciar riposare per 30 secondi; particelle di cadmio che non si siano ossidate si depositeranno sul fondo;

decantare lentamente nella seconda provetta in modo che il cadmio residuo resti nella prima provetta, sciacquare quest’ultima con acqua distillata;

alla provetta che contiene il liquido appena decantato aggiungere, dopo averlo aperto con le forbici, il contenuto della bustina di Nitriver 3, agitando per 30 secondi;

un colore rosso si svilupperà se i nitrati sono presenti;

attendere almeno 10 minuti ma non più di venti per effettuare la lettura colorimetrica ponendo nel colorimetro a destra la provetta con i reattivi e a sinistra la provetta con l’acqua da campionare (“il bianco”);

leggere il valore in mg/L di azoto nitrato presente nel campione attraverso l’indice presente nella finestra del colorimetro e moltiplicarlo per 10;

per ottenere il risultato come mg/L di nitrato bisogna moltiplicare il valore letto per 4,4.

* Nella metodica con concentrazioni 0-1 mg/L il procedimento è il medesimo solo che il campione non viene diluito, pertanto si pongono nella provetta direttamente 5 ml dell’acqua da campionare   e la lettura e trasformazine avviene senza moltiplicare per 10.

Coliformi

I coliformi rappresentano un fattore importante nell'inquinamento delle acque. Per esempio nelle acque di fogna c'è un' altissima presenza di coliformi in quanto le feci contengono un gran numero di questi batteri, quindi più un'acqua è priva di coliformi, più risulta pulita.

PROTOCOLLO RILEVAMENTO COLIFORMI FECALI

SCOPO : Determinare la presenza di coliformi fecali nel campione d’acqua.

GENERALITA’ : La presenza di coliformi fecali è indice di inquinamento di origine fecale ed indice di pessime condizioni igieniche.

TEMPO DI ESECUZIONE : 20-25 minuti



MATERIALI ED ATTREZZATURE :

Kit per i coliformi fecali;

acqua distillata;

pennarello

MISURAZIONE : (preparazione capsula petri)

Sterilizzare la punta delle pinzette passandola con alcool e poi alla fiamma;

prelevare un cartoncino da terreno di coltura e porla nella capsula petri aprendola al minimo;

aggiungere la fialetta di terreno di coltura;

(preparazione apparecchio)

Filtrare, senza membrana, abbondante acqua sterile per lavare l’apparecchio che deve, prima dell’utilizzo in campo essere posto in acqua bollente per almeno 10 minuti;

sterilizzare la punta delle pinzette passandola con alcool e poi alla fiamma ed usarla per prelevare una membrana che va posta nell’apparecchio di filtraggio.

(semina)

Porre nell’apparecchio 10 ml di acqua sterile per effettuare un miglior filtraggio se le quantità di campione sono inferiori ai 5 ml;

immettere il campione nell’apparecchio utilizzando le pipette monouso sterili;

lavare le pareti con acqua sterile, filtrare;

porre la membrana sul terreno di coltura evitando di contaminarla;

posizionare le capsule Petri nel frigo in attesa di essere collocate in incubatore per almeno 48 ore; atteso tale tempo, effettuare la conta delle colonie.